潔凈實(shí)驗(yàn)室生物安全柜操作及使用方法

生物安全柜合理定期維護(hù)注意事項(xiàng)

合理定期的維護(hù)對(duì)維護(hù)任何設(shè)備的正常工作都是至關(guān)重要地，這一點(diǎn)對(duì)生物安全柜也不例外。按照下面推薦的維護(hù)日程表對(duì)安全柜進(jìn)行維護(hù)，保持其性能。為您介紹潔凈實(shí)驗(yàn)室生物安全柜操作及使用方法。

一．每日維護(hù)

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視用戶(hù)使用的材料而定）*對(duì)安全柜內(nèi)部工作區(qū)域表面、側(cè)壁、后壁、窗戶(hù)進(jìn)行表面凈化。不要用含有氯的殺菌劑，因?yàn)樗赡軐?duì)安全柜的不銹鋼結(jié)構(gòu)造成損壞。也要對(duì)紫外燈和電源輸出口表面進(jìn)行清潔。當(dāng)清潔安全柜內(nèi)部區(qū)域時(shí)，操作人員除了手放以外，身體的其他任何部位不能進(jìn)入安全柜。

2）檢查警報(bào)并檢測(cè)基本氣流

二．每周維護(hù)

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視使用的材料而定）*對(duì)排水槽進(jìn)行清洗

2）檢查殘留物質(zhì)

三．每月維護(hù)

1）用濕布對(duì)安全柜外部表面進(jìn)行擦拭，尤其是安全柜的前面和上部，把堆積的灰塵打掃干凈。

2）檢查所有的維護(hù)配件的合理使用情況。

3）上述每日工作中的條目

四．每季維護(hù)

1）檢查安全柜的任何物理異常或故障。檢查熒光顯像管確保它們工作正常

2）當(dāng)不銹鋼上表面有難以去除的斑點(diǎn)時(shí)，可以使用MEK（methyl-ethyl-ketone）。使用WEK后，快速用清水和液體清潔劑沖洗不銹鋼板，并且用聚亞安酯布或者海綿進(jìn)行擦拭。定期清潔不銹鋼表面會(huì)使之保持表面的光滑美觀。

五．每年維護(hù)

1）具備資格的認(rèn)證技術(shù)人員對(duì)安全柜進(jìn)行性能認(rèn)證。

2）更換紫外燈

3）上述的每季維護(hù)

生物安全等級(jí)

生物安全等級(jí)P1

進(jìn)行試驗(yàn)研究用的物質(zhì)都是已知的,所有特性都已清楚并且已證明不會(huì)導(dǎo)致疾病的多種微生物物質(zhì)。研究通過(guò)日常的程序在公開(kāi)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上進(jìn)行。不需要有特殊需求的安全保護(hù)措施。操作人員只需經(jīng)過(guò)基本的實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)程序培訓(xùn)并且通常由科研人員指導(dǎo)，在這樣的環(huán)境下并不需要生物安全柜的存在。

生物安全等級(jí)P2

進(jìn)行試驗(yàn)研究用的物質(zhì)是一些已知的中等程度危險(xiǎn)性的并且與人類(lèi)某些常見(jiàn)疾病相關(guān)的物質(zhì)。操作者必須經(jīng)過(guò)進(jìn)行相關(guān)研究的操作培訓(xùn)并且由專(zhuān)業(yè)科研人員指導(dǎo)。對(duì)于易于污染的物質(zhì)或者可能產(chǎn)生污染的情況進(jìn)行預(yù)先的處理準(zhǔn)備。一些可能涉及或者產(chǎn)生有害生物物質(zhì)的操作過(guò)程都應(yīng)該在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，在這些條件下使用二級(jí)的生物安全柜。

生物安全等級(jí)P3

進(jìn)行試驗(yàn)研究的物質(zhì)一般都是本土或者外來(lái)的有通過(guò)呼吸傳染使人們致病或者有生命危險(xiǎn)的可能的物質(zhì)。我們需要保護(hù)一切在周?chē)h(huán)境中等操作者免于暴露于這些有潛在危險(xiǎn)的物質(zhì)中。通常使用二級(jí)或者三級(jí)的生物安全柜是必需的。

生物安全等級(jí)P4

進(jìn)行試驗(yàn)研究的物質(zhì)是一些非常高危險(xiǎn)性并且可以致命的有毒物質(zhì)，可以通過(guò)空氣傳播并且現(xiàn)今并沒(méi)有有效的疫苗或者治療方法來(lái)處理。操作者必須經(jīng)過(guò)熟練的關(guān)于進(jìn)行這種非常高危險(xiǎn)性物質(zhì)研究的培訓(xùn)，并且應(yīng)該很熟悉一些相關(guān)操作，保護(hù)設(shè)施，實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)等等方面對(duì)于這些高危險(xiǎn)性物質(zhì)的預(yù)防。同時(shí)也必須由在此研究領(lǐng)域非常有經(jīng)驗(yàn)的科研人員進(jìn)行指導(dǎo)。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)出應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格的進(jìn)行控制，實(shí)驗(yàn)室一定要單獨(dú)的建造或者建造在一棟大樓中于其他任何地方都分離開(kāi)的獨(dú)立房間內(nèi)，并且要求有詳細(xì)的關(guān)于研究的操作手冊(cè)進(jìn)行參考。在這樣的實(shí)驗(yàn)研究中三級(jí)的生物安全柜是必需的。

生物安全柜柜內(nèi)操作主要注意事項(xiàng)：

1、緩慢移動(dòng)原則：為了避免影響正常的風(fēng)路狀態(tài)，柜內(nèi)操作時(shí)手應(yīng)該盡量平緩移動(dòng)。

2、物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現(xiàn)象產(chǎn)生，在柜內(nèi)擺放的物品應(yīng)該盡量呈橫向一字?jǐn)[開(kāi)，避免回風(fēng)過(guò)程中造成交叉污染。同時(shí)避免堵塞背部回風(fēng)隔柵影響正常風(fēng)路。

3、避免震動(dòng)原則：柜內(nèi)盡量避免震動(dòng)儀器（例如離心機(jī)、旋渦振蕩器等）的使用，因?yàn)檎饎?dòng)會(huì)使得積留在濾膜上的顆粒物質(zhì)抖落，導(dǎo)致操作室內(nèi)部潔凈度降低，同時(shí)如果在前操作面平衡失敗還會(huì)引起安全柜對(duì)操作者的污染。

4、不同樣品柜內(nèi)移動(dòng)原則：柜內(nèi)兩種及以上物品需要移動(dòng)時(shí)，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移動(dòng)原則，避免污染性高的物品在移動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生對(duì)柜體內(nèi)部的大面積污染。

5、明火使用原則：柜內(nèi)盡量不要使用明火！因?yàn)樵诿骰鹗褂眠^(guò)程中產(chǎn)生的細(xì)小顆粒雜質(zhì)將被帶入濾膜區(qū)域，這些高溫雜質(zhì)會(huì)損傷濾膜。無(wú)法避免一定需要使用的時(shí)候，宜使用低火苗的本生燈。

生物安全柜操作及使用方法

1.生物安全柜的選擇

主要根據(jù)下列所需保護(hù)的類(lèi)型來(lái)選擇適當(dāng)?shù)纳锇踩瘢簩?shí)驗(yàn)對(duì)象保護(hù)；操作危險(xiǎn)度1～4級(jí)微生物時(shí)的個(gè)體防護(hù)；暴露于放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品時(shí)的個(gè)體防護(hù)；或上述各種防護(hù)的不同組合。表1列出了每一種防護(hù)類(lèi)型所推薦使用的生物安全柜。

操作揮發(fā)性或有毒化學(xué)品時(shí)，不應(yīng)該使用將空氣重新循環(huán)排入房間的生物安全柜，即不與建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的Ⅰ級(jí)生物安全柜，或Ⅱ級(jí)A1型及Ⅱ級(jí)A2型生物安全柜。Ⅱ級(jí)B1型安全柜可用于操作少量揮發(fā)性化學(xué)品和放射性核素。Ⅱ級(jí)B2型安全柜也稱(chēng)為全排放型安全柜，在需要操作大量放射性核素和揮發(fā)性化學(xué)品時(shí)，必須使用這一類(lèi)型的安全柜。

2.實(shí)驗(yàn)室中生物安全柜的使用位置

空氣通過(guò)前面開(kāi)口進(jìn)入生物安全柜的速度大約為0．45 m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流、打開(kāi)窗戶(hù)、送風(fēng)系統(tǒng)調(diào)整以及開(kāi)關(guān)門(mén)等都可能造成影響。因此，zui為理想的是，生物安全柜應(yīng)位于遠(yuǎn)離人員活動(dòng)、物品流動(dòng)以及可能會(huì)擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個(gè)側(cè)面要盡可能留有30 cm的空間，以利于對(duì)安全柜的維護(hù)。在安全柜的上面應(yīng)留有30～35 cm的空間，以便準(zhǔn)確測(cè)量空氣通過(guò)排風(fēng)過(guò)濾器的速度，并便于排風(fēng)過(guò)濾器的更換。

3.操作者

生物安全柜如果使用不當(dāng)，其防護(hù)作用就可能大大受到影響。操作者在移動(dòng)雙臂進(jìn)出安全柜時(shí)，需要小心維持前面開(kāi)口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開(kāi)口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過(guò)”手和雙臂的表面以后，才可以開(kāi)始對(duì)物品進(jìn)行處理。要在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前將所有必需的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開(kāi)口的次數(shù)。

3.物品放置

Ⅱ級(jí)生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或其他物品阻擋。放入安全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來(lái)清除表面污染。可以在消毒劑浸濕的毛巾上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以吸收可能濺出的液滴。所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺(tái)后部靠近工作臺(tái)后緣的位置，并使其在操作中不會(huì)阻擋后部格柵。可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備（例如混勻器、離心機(jī)等）應(yīng)靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。在工作臺(tái)面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤(pán)不應(yīng)放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會(huì)干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對(duì)人員和物品的防護(hù)。

安全柜內(nèi)的空氣可以通過(guò)HEPA過(guò)濾器按下列方式排出：（a）排到實(shí)驗(yàn)室中，然后再通過(guò)實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面；（b）通過(guò)建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面；（c）直接排到建筑物外面。HEPA過(guò)濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風(fēng)系統(tǒng)（the exhaust plenum）里，也可以裝在建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)里。有些Ⅰ級(jí)生物安全柜裝有一體式排風(fēng)扇，而其他的則是借助建筑物排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)扇。

Ⅰ級(jí)生物安全柜是zui早得到認(rèn)可的，并且由于其設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，目前仍在世界各地廣泛使用。Ⅰ級(jí)生物安全柜能夠?yàn)槿藛T和環(huán)境提供保護(hù)，也可用于操作放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品。但因未滅菌的房間空氣通過(guò)生物安全柜正面的開(kāi)口處直接吹到工作臺(tái)面上，因此Ⅰ級(jí)生物安全柜對(duì)操作對(duì)象不能提供切實(shí)可靠的保護(hù)。

Ⅱ級(jí)生物安全柜在應(yīng)用細(xì)胞和組織培養(yǎng)物來(lái)進(jìn)行病毒繁殖或其他培養(yǎng)時(shí)，未經(jīng)滅菌的房間空氣通過(guò)工作臺(tái)面是不符合要求的。Ⅱ級(jí)生物安全柜在設(shè)計(jì)上不但能提供個(gè)體防護(hù)，而且能保護(hù)工作臺(tái)面的物品不受房間空氣的污染。Ⅱ級(jí)生物安全柜有四種不同的類(lèi)型（分別為A1、A2、B1和B2型），它們不同于Ⅰ級(jí)生物安全柜之處為，只讓經(jīng)HEPA過(guò)濾的（無(wú)菌的）空氣流過(guò)工作臺(tái)面。Ⅱ級(jí)生物安全柜可用于操作危險(xiǎn)度2級(jí)和3級(jí)的感染性物質(zhì)。在使用正壓防護(hù)服的條件下，Ⅱ級(jí)生物安全柜也可用于操作危險(xiǎn)度4級(jí)的感染性物質(zhì)。